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                  Vero細胞系特性和應用

                  更新時間:2024-04-09      點擊次數:50

                  Vero細胞系是一種源自非洲綠猴腎上皮細胞的永生化哺乳動物細胞模型,站在病毒學、微生物學以及細胞和分子生物學研究的前沿。它們的廣泛應用涵蓋疫苗開發、藥物篩選以及病毒和寄生蟲生物學、腫瘤免疫學和免疫治療策略的探索。

                  Vero細胞系的建立可以追溯到1962年,起源于非洲綠猴的腎上皮細胞。

                  Vero細胞克隆及其性質

                  來自Vero細胞系的不同克隆顯示出區別于原始細胞系的特征。其中,兩個著名的Vero細胞克隆是:

                  • Vero E6細胞系:該克隆也稱為Vero C1008,來自Vero 76細胞,1979年由P.J. Price在微量滴定板上使用稀釋技術分離。Vero E6細胞特別適合培養復制緩慢的病毒。

                  • Vero 76細胞:這些細胞起源于1968年的一只非洲綠猴的腎臟,保持了Vero細胞的上皮形態特征。

                  這些Vero細胞變體與親代細胞系一起,繼續有助于推進病毒學研究和醫學干預措施的發展,標志著它們在科學界的重要性。

                  培養猴細胞系Vero細胞需要熟悉特定的參數,如倍增時間、接種密度和合適的生長培養基。

                  • 人口倍增時間:Vero細胞的倍增時間約為24小時。

                  • 堅持性:Vero細胞粘附在表面上,培養時通常形成單層。

                  • 播種密度:建議從1倍10^4 cells/cm^2.的播種密度開始為了培養粘附的Vero細胞,用PBS清洗它們并用Accutase處理它們以分離它們。分離后,離心細胞,將其重新懸浮在新鮮培養基中,并將其轉移到新的培養瓶中。

                  • 生長培養基:哈姆的F12和DMEM都是培養Vero細胞的合適培養基。這些應補充2.5mM L-谷氨酰胺和5%胎牛血清(FBS)以支持最佳生長。培養基應該每周更新兩到三次。

                  • 生長條件:Vero細胞在37°C的溫度和5% CO2的潮濕環境中生長旺盛。

                  • 存儲:對于長期儲存,Vero電池應保持在低于-150°C的溫度下,要么放在超低溫冰箱中,要么放在液氮的蒸汽相中。

                  • 冷凍過程和介質:對于冷凍保存,使用CM-1或CM-ACF或含有FBS和DMSO的生長培養基作為冷凍培養基。采用緩慢冷凍技術,每分鐘逐漸降低1°C的溫度。

                  • 解凍過程:將容器浸入37°C水浴中并輕輕攪動40-60秒,解凍Vero細胞。然后,在新鮮培養基中稀釋細胞,離心去除冷凍保護劑,重新懸浮在新鮮生長培養基中,并將其置于新的燒瓶中以恢復和生長。

                  • 生物安全等級:Vero細胞應在符合1級生物安全要求的實驗室中處理。

                  Vero細胞系在研究中的應用

                  Vero細胞系在細胞生物學和病毒學領域有許多研究應用。在這里,我們討論了一些具體的問題。


                  病毒研究和疫苗生產中的Vero細胞

                  源自非洲綠猴腎細胞的Vero細胞已成為多種病毒疫苗生物過程開發中的主要成分,包括脊髓灰質炎病毒和日本腦炎病毒。它們在貼壁和懸浮培養中的適應性及其廣泛的病毒支持能力,包括對小反芻獸疫病毒等病原體的支持能力,突出了它們在病毒分離和疫苗開發中的重要性。

                  許多研究利用Vero細胞生產人類疫苗。例如,2019年發表的一項引人注目的研究證明了在黃熱病病毒滅活疫苗的開發中使用Vero細胞【2】。

                  Vero細胞通常用于病毒感染研究。

                  Vero細胞在組織工程和上游生物過程開發中的作用

                  除了疫苗生產,Vero細胞還有助于組織工程和更廣泛的生物過程開發領域,這強調了對其特性和應用進行持續研究的必要性。選擇合適的Vero細胞亞系是最大限度地發揮其在生物技術和制藥工業中的潛力的關鍵。

                  Vero細胞在藥物療效和安全性測試中的應用

                  Vero細胞經常用于藥物測試,以評估藥物化合物的有效性和安全性。在研究各種藥物和治療劑的細胞毒性作用時,這些細胞通常被認為是正常腎細胞的標準模型。例如,研究比較了白骨壤植物根提取物對肝癌細胞系HepG2和猴腎上皮細胞Vero細胞的影響,發現提取物對癌細胞的損害比對正常細胞的損害更大。

                  Vero細胞的局限性

                  盡管vero細胞被廣泛使用,但它們也有其局限性,例如Vero毒素的產生和基因組的改變可能會影響某些應用。了解Vero細胞(包括Vero譜系F6)的特定亞系和基因組特征對于優化其在各種生物過程中的應用至關重要。


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